基因放射性核素反义治疗肾癌的体内外实验研究

摘要

目的探讨Ki67基因放射性核素反义治疗对人肾癌细胞生长及凋亡的影响。方法人工合成Ki67基因反义核酸(ASODNs),氯胺-T法125I标记ASODNs(125I-ASODNs)。①体外实验:125I-ASODNs(10.0μmol/L、2.59MBq/L)转染人肾癌786-0细胞,采用免疫组化、Westernblot检测Ki67表达;免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。以ASODNs(10.0μmol/L)为对照。②动物实验:建立786-0细胞BALB/C-nu裸鼠模型,125I-ASODNs治疗组瘤体注射0.1ml125I-ASODNs(7.4MBq/L、10nmol),ASODNs治疗组瘤体注射0.1mlASODNs(10nmol),连续4天。药物处理后第6天取瘤组织检测肿瘤体积、Ki67表达、细胞凋亡。结果①体外实验:125I-ASODNs治疗组肾癌细胞Ki67表达阳性率[(21.5±1.2)%]降低,Ki67蛋白[(49.9±4.5)%]降低,细胞凋亡率[(28.9±1.3)%]升高,与ASODNs治疗组[(29.9±0.4)%、(82.1±1.9)%、(15.7±0.5)%]比较差异有显著性(P<0.01)。②动物实验:125I-ASODNs治疗组小鼠肿瘤体积(mm3)(76.1±22.9)减小,Ki-67表达率[(20.8±1.0)%]下降,Ki-67蛋白量[(58.6±2.9)%]降低,肿瘤细胞凋亡率[(24.9±2.0)%]升高,与ASODNs治疗组[(185.7±37.7)、(29.2±1)%、(79.7±3.4)%、(17.8±1.9)%]比较差异有显著性(P<0.01)。结论Ki67基因放射性核素反义治疗较单纯反义治疗具有更强的阻抑肾癌细胞Ki67基因表达、抑制增殖、促进凋亡作用。

关键词

肾癌 / 反义寡核苷酸 / 放射性核素 / Ki67基因

基金资助

江苏省卫生厅医学科技发展基金(H2000153); 江苏省高校自然科学基金(02KJD320030)