Sox9、siRNA表达载体的构建与鉴定

彭易根; 秦宏敏; 许铁; 胡书群; 韩会峰

徐州医科大学学报 ›› 2007, Vol. 0 ›› Issue (01) : 19 -22.

彭易根, 秦宏敏, 许铁, 胡书群, 韩会峰

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摘要

目的构建Sox9siRNA表达载体,分析Sox9在软骨肉瘤中的作用机制。方法根据KouI,IkegawaS提供的Sox9mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSilencer质粒中,并对重组质粒(命名为pSilencer/Sox9siRNA)进行酶切及测序鉴定。结果双酶切证实Sox9siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论成功构建Sox9siRNA表达载体。