异常血流动力对HUVEC胆固醇代谢的影响及其致AS的机制

摘要

目的 通过研究异常血流动力对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)摄取、合成及外排胆固醇的影响，进一步探讨异常血流动力和胆固醇代谢在动脉粥样硬化(AS)形成机制中的作用。方法 待细胞生长良好后，换用新的含有低密度脂蛋白(LDL)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的培养液，同时施加作用力。按照细胞所受作用力不同，随机分为应力组、壁面压力组、对照组A和对照组B。在各自作用力的作用下培养24 h。收集细胞和培养液待用。用酶法检测4组培养液中LDL浓度和胆固醇浓度。用高效液相色谱法检测HUVEC内和细胞膜中胆固醇的含量。分别用实时定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、羟-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CR)、ABCA1的mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组B相比较，应力组培养液中LDL含量明显减少，细胞内胆固醇含量明显增高，而且LDLR和HMG-CR的mRNA和蛋白表达明显增高。壁面压力组培养液中胆固醇含量明显增高，细胞膜中胆固醇含量明显降低，而且ABCA1的mRNA和蛋白表达明显增高。对照组A培养液中LDL含量明显降低，胆固醇含量明显增高，而且LDLR、HMG-CR和ABCA1的mRNA和蛋白表达均明显增高。结论 应力通过上调LDLR和HMG-CR的mRNA和蛋白的表达促进VEC摄取LDL和合成胆固醇，壁面压力通过上调ABCA1的mRNA和蛋白的表达促进内皮细胞膜外排胆固醇。异常血流动力使血管内皮细胞胆固醇代谢平衡紊乱进而引起AS。

关键词

三磷酸腺苷结合盒转运体A1 / 低密度脂蛋白受体 / 羟-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 / 动脉粥样硬化 / 壁面压力 / 应力