褪黑素通过抑制FGA调节FAK/AKT/MMP-2通路对人子宫内膜间质细胞的作用研究

摘要

目的探究褪黑素对子宫内膜异位症在位子宫内膜间质细胞(ESC)的作用及其可能的作用机制。方法收集13例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜组织进行ESC细胞原代分离培养。分别加入0.25、0.5、1mmol/L褪黑素处理细胞后,CCK-8检测细胞活力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR检测细胞中纤维蛋白原α链(FGA)mRNA表达,Western blot检测细胞角蛋白(Keratin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)、FGA、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、黏着斑激酶(FAK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果成功分离培养ESC细胞。与空白对照组相比,0.25mmol/L、0.5mmol/L和1mmol/L褪黑素处理ESC细胞后细胞活力、细胞迁移数和侵袭数明显降低(P<0.05),Keratin蛋白表达明显升高(P<0.05),Vimentin、Slug、FGA、p-FAK/FAK、p-AKT/AKT和MMP-2蛋白表达明显降低(P<0.05),且褪黑素对ESC细胞的作用呈剂量依赖性。与褪黑素+oe-NC组相比,褪黑素+oe-FGA组细胞活力、细胞迁移数和侵袭数明显升高(P<0.05),Keratin蛋白表达明显降低(P<0.05),FGA mRNA表达以及Vimentin、Slug、FGA、p-FAK/FAK、p-AKT/AKT和MMP-2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论褪黑素可能通过抑制FGA介导的FAK/AKT/MMP-2通路激活从而抑制ESC细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化,从而抑制子宫内膜异位症疾病进展。

关键词

褪黑素 / 子宫内膜异位症 / 子宫内膜间质细胞 / 纤维蛋白原α链