PRMT6通过抑制PTEN/β-catenin通路对脂多糖诱导的肺支气管上皮细胞损伤的影响

摘要

目的探究蛋白质精氨酸甲基转移酶6(PRMT6)对脂多糖(LPS)诱导的肺支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,qRT-PCR检测细胞PRMT6mRNA表达;Western blot检测细胞PRMT6、磷酸酶和张力蛋白同源酶(PTEN)、磷酸化β-连环蛋白(p-β-catenin)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达;CCK-8检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)产生;检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果 LPS呈剂量依赖性抑制细胞中PRMT6mRNA和蛋白表达。与空白对照组相比,LPS组细胞中PRMT6 mRNA和蛋白表达、p-β-catenin/β-catenin蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞活力、SOD活性明显降低(P<0.05),PTEN蛋白表达、细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量和LDH活性明显升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+过表达空白对照(oe-NC)组细胞各指标差异均无统计学意义(P>0.05);与LPS+oe-NC组相比,LPS+过表达PRMT6(oe-PRMT6)组细胞中PRMT6mRNA和蛋白表达、p-β-catenin/β-catenin蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞活力、SOD活性明显升高(P<0.05),PTEN蛋白表达、细胞凋亡率和ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量及LDH活性明显降低(P<0.05);与LPS+oePRMT6组相比,LPS+oe-PRMT6+过表达PTEN(oe-PTEN)组细胞中PRMT6表达差异无统计学意义(P>0.05),p-β-catenin/β-catenin蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞活力、SOD活性明显降低(P<0.05),PTEN蛋白表达、细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量和LDH活性明显升高(P<0.05)。结论 PRMT6通过抑制PTEN/β-catenin通路改善LPS诱导的肺支气管上皮细胞损伤。

关键词

支气管上皮细胞 / 脂多糖 / 蛋白质精氨酸甲基转移酶6 / 磷酸酶和张力蛋白同源酶 / β-连环蛋白