Flt3基因体外转染对H9c2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

摘要

目的探讨腺病毒转染Flt3基因对H9c2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响。方法建立H9c2大鼠心肌细胞模拟缺血再灌注模型。Flt3基因腺病毒转染H9c2大鼠心肌细胞,缺血再灌注后免疫荧光法验证转染效果。将H9c2大鼠心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧复氧组(IRI组)、空载体组(Ad-GFP组)及基因转染组(Ad-Flt3组)。Western blot法检测Flt3蛋白、Caspase-3蛋白的表达。采用CCK-8法检测各组心肌细胞活性。比色法测定乳酸脱氧酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与C组比较,心肌细胞缺血再灌注损伤后Flt3蛋白表达下降(P<0.05),Caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.01),细胞活力显著下降(P<0.05)。转染Flt3基因后心肌细胞中的Flt3蛋白较未转染细胞显著增加(P<0.05),Caspase-3蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞活力显著升高(P<0.01)。与C组比较,缺血再灌注后细胞上清液LDH、CK-MB、MDA含量显著升高,SOD活性显著下降(P<0.05或P<0.01),而Flt3基因转染后细胞上清液LDH、CK-MB、MDA含量较未转染细胞显著降低,SOD活性升高(P<0.05或P<0.01)。结论Flt3基因转染H9c2大鼠心肌细胞可减轻细胞缺血再灌注损伤,其机制可能与抗氧化应激及减轻细胞凋亡有关。

关键词

Flt3基因 / 缺血再灌注损伤 / 转染