α-山竹黄酮对高糖培养的肾小球系膜细胞凋亡的影响

摘要

目的体外研究α-山竹黄酮通过抑制酸性鞘磷脂酶(ASMase)及内质网应激信号通路对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞(MES13)凋亡的影响。方法将同步化后的MES13细胞分为低糖组(5.5mmol/L葡萄糖)、低糖+α-山竹黄酮组、高糖组(30mmol/L葡萄糖)、高糖+低浓度α-山竹黄酮组(1μmol/L)、高糖+中浓度α-山竹黄酮组(2μmol/L)、高糖+高浓度α-山竹黄酮组(4μmol/L)、高糖+地西帕明组。采用CCK-8法检测细胞活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用Western blot检测细胞中ASMase及内质网应激相关蛋白GRP78、p-PERK、ATF4及内质网应激凋亡相关蛋白CHOP、caspase12的表达水平。结果与低糖组相比,高糖组MES13细胞凋亡水平明显增加(P<0.05);与高糖组相比,高糖+α-山竹黄酮组细胞凋亡率降低,且呈剂量依赖性。与低糖组相比,高糖组MES13细胞ASMase蛋白表达显著增加(P<0.05);与高糖组相比,高糖+α-山竹黄酮组ASMase蛋白表达减少(P<0.05)。与低糖组相比,高糖组GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP、caspase12等蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与高糖组相比,高糖+α-山竹黄酮组GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP、caspase12等蛋白表达水平明显减少(P<0.05)。结论α-山竹黄酮通过抑制高糖激活的ASMase,降低内质网应激信号通路,进而减少高糖培养的MES13细胞凋亡。

关键词

α-山竹黄酮 / 糖尿病肾病 / 酸性鞘磷脂酶 / 内质网应激 / 系膜细胞