5-氨基酮戊酸光动力疗法预处理减轻中波紫外线诱导的人成纤维细胞的凋亡水平

摘要

目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-aminolevulinic photodynamic therapy,ALA-PDT)预处理对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐射后体外培养的人皮肤成纤维细胞增殖以及凋亡的影响。方法采用低剂量ALA-PDT预处理人皮肤成纤维细胞,随后予60 m J/cm2UVB急性辐射,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测细胞的线粒体膜电位变化,Western blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine-requiring aspartate protease 3,Caspase-3)、BCL2-associated X的蛋白质(BCL2-associated X,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的表达。结果与UVB组比较,倒置显微镜下观察到ALA-PDT-UVB组的细胞碎片更少,细胞排列更为紧密; CCK-8结果提示ALA-PDT-UVB组细胞增殖活性更强; Annexin V/PI双染法及线粒体膜电位结果显示ALA-PDT-UVB组凋亡更少; Western blot结果显示ALA-PDT-UVB组Caspase-3、Bcl-2表达水平增高,Bax表达水平降低。结论低剂量ALA-PDT预处理能显著逆转UVB急性辐射引起的细胞凋亡,并影响凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达,从而发挥光保护作用。

关键词

5-氨基酮戊酸光动力疗法 / 中波紫外线 / 凋亡 / 人皮肤成纤维细胞 / 光保护