长链非编码RNA uc.412介导转化生长因子-β1诱导的系膜细胞自噬的机制研究

摘要

目的探究长链非编码RNA uc. 412(long non-coding RNA uc. 412,LncRNA uc. 412)在转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)诱导的系膜细胞自噬中的作用及相关机制。方法用TGF-β1 (10μg/L)干预大鼠系膜细胞,Western blot法检测自噬标志物LC3、p62的蛋白表达,Real-time PCR法检测LncRNA uc. 412的表达;采用LncRNA uc. 412过表达慢病毒转染系膜细胞并用Real-time PCR法检测转染效率,分别采用Western blot法和Real-time PCR法检测LC3和p62在蛋白水平和mRNA水平表达变化;用TGF-β1(10μg/L)和Smad3特异性磷酸化抑制剂SIS3(1μmol)干预系膜细胞,Western blot法检测p Smad3的蛋白表达,Realtime PCR法检测LncRNA uc. 412的表达。结果与对照组相比,TGF-β1组LC3Ⅱ/Ⅰ、p62表达上调(P <0.05),LncRNA uc. 412表达增加(P <0.05);过表达LncRNA uc. 412组LC3和p62在蛋白和mRNA水平高于对照组和病毒空载组(P <0.05);与对照组相比,TGF-β1组p Smad3蛋白和LncRNA uc. 412表达上调(P <0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+SIS3组p Smad3蛋白和LncRNA uc. 412表达下降(P <0.05)。结论 LncRNA uc. 412可能作为TGF-β1/Smad3通路的下游效应分子促进系膜细胞自噬,并且为慢性肾脏病的诊治提供新的思路。

关键词

长链非编码RNA uc. 412 / 转化生长因子-β1 / 系膜细胞 / 自噬