三阴乳腺癌患者血液外泌体mi RNA-27a/P-gp在新辅助化疗后的变化及其对血管新生的影响

摘要

目的研究新辅助化疗(NACT)前后三阴乳腺癌(TNBC)患者血液外泌体中mi R-27a/P-gp对血管新生的调节机制。方法分离并鉴定NACT组与对照组(单独表柔比星治疗) TNBC患者血液外泌体。RTq PCR法检测血液外泌体中mi R-27a/P-gp的表达量。荧光素酶报告基因实验研究mi R-27a/P-gp的关系。低表达mi R-27a的外泌体(EXO-mi R-27a-)、高表达mi R-27a的外泌体(EXO-mi R-27a+)、mi R-27a拟似物(mi R-27a-mimic)和阴性对照(mimic-NC)、P-gp过表达质粒(pc DNA3.1-P-gp)及相应的对照物(pc DNA3.1-null)分别处理人微血管内皮细胞(HMVEC)。ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)水平,蛋白免疫印迹法检测VEGF-A的表达,小管形成实验评估血管生成能力。结果与对照组比较,NACT组的血液和外泌体中mi R-27a的表达下调,P-gp表达上调(P <0.05);与治疗前比较,NACT组治疗后的血液和外泌体中mi R-27a表达下调,而P-gp的表达上调(P <0.05); HMVEC细胞中,EXO-mi R-27a+组的VEGF水平和血管生成能力较EXO-mi R-27a-组增加(P <0.05)。mi R-27a-mimic组的VEGF水平和血管生成能力较mimic-NC组增加(P <0.05)。mi R-27a靶向抑制P-gp。pc DNA3.1-P-gp组VEGF水平和血管生成能力较pc DNA3.1-null组降低(P <0.05)。pc DNA3.1-P-gp+mi R-27a-mimic组VEGF水平和血管生成能力较pc DNA3.1-null+mi R-27a-mimic组降低(P <0.05)。结论 NACT治疗TNBC患者后外泌体mi R-27a下调,而P-gp上调,mi R-27a通过抑制P-gp促进血管新生。

关键词

微小RNA-27a / P-gp / 新辅助化疗 / 三阴乳腺癌 / 人微血管内皮细胞 / 血管生成