血红素氧化酶1调控巨噬细胞极化对动脉粥样硬化的影响

摘要

目的探讨血红素氧化酶1(HO-1)调节巨噬细胞对动脉粥样硬化的作用。方法 100 mg/L脂多糖(LPS)和20 mg/L白介素4(IL-4)分别诱导RAW264. 7细胞24 h,提取信使核糖核酸(mRNA)和蛋白,实时定量聚合酶链式反应法(RT-q PCR)检测LPS和IL-4诱导后巨噬细胞中HO-1、CD163和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测LPS和IL-4诱导巨噬细胞后HO-1蛋白表达。大体油红O染色检测载脂蛋白E敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饮食后主动脉斑块面积变化,RT-q PCR和Western blot检测主动脉中HO-1 mRNA和蛋白表达。组织免疫荧光检测HO-1在主动脉窦部斑块中与促炎型(M1)和抑炎型(M2)巨噬细胞的共定位表达。结果 LPS和IL-4成功诱导巨噬细胞分化为M1型与M2型巨噬细胞; IL-4诱导巨噬细胞中HO-1表达显著高于LPS及对照组(P <0. 05);动脉粥样硬化模型构建成功; HO-1在Apo E-/-小鼠中表达显著高于C57BL/6对照组(P <0. 05),主动脉窦中HO-1与CD206的共定位表达显著高于HO-1与CD86。结论 HO-1在M2型巨噬细胞中的表达显著高于M1型巨噬细胞,在动脉硬化发展中起保护作用。

关键词

血红素氧化酶1 / 巨噬细胞 / 极化 / 动脉粥样硬化 / 小鼠

基金资助

江苏省自然科学基金(BK20151151,BK20170251); 中国博士后基金(2016M590506); 江苏省博士后基金(1501010B); 江苏省高等学校自然科学基金(17KJD320005,17KJB320022); 江苏省免疫与代谢重点实验室开放研究课题(JSKIM201701); 江苏省海外留学基金; 徐州医科大学优秀博士启动基金(D2016015)