白癜风患者血浆miRNA6089水平对黑素细胞功能的影响

摘要

目的 观察白癜风患者血浆miRNA6089水平对黑素细胞功能的影响，丰富miRNA调控黑素细胞参与白癜风疾病进程的遗传证据。方法 前期使用miRNA芯片技术筛选白癜风患者与健康对照者血浆样本中差异miRNA。使用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测年龄匹配的白癜风患者和健康对照者血浆中miRNA6089的差异表达。利用人包皮组织原代提取黑素细胞，化学合成miRNA6089核酸模拟物(mimic)和抑制物，黑素细胞转染miRNA6089模拟物和抑制物。细胞分组为Si-NC组(对照抑制物转染)、Si组(miRNA6089抑制物转染)、mimic-NC组(对照模拟物转染)、mimic组(miRNA6089模拟物转染)。CCK-8法检测黑素细胞活力，RT-qPCR、Western blot法检测各组miRNA6089和双微体同源物2(MDM2)、溶质载体家族17成员5(SLC17A5)、Janus激酶3(JAK3)的差异表达。使用HDOCK和PLIP平台评估miRNA6089与MDM2、SLC17A5、JAK3的潜在靶向关系。结果 相较于健康对照血浆样本，白癜风患者血浆中miRNA6089表达水平显著升高。在黑素细胞水平，与Si-NC组相比，Si组细胞活力明显增加，MDM2、SLC17A5、JAK3的mRNA和蛋白表达水平均增加；而过表达的mimic组与mimic-NC组相比，细胞活力显著减弱，MDM2、SLC17A5、JAK3的mRNA和蛋白表达水平显著降低。miRNA6089与MDM2、SLC17A5、JAK3的结合活力均较好。结论 miRNA6089对黑素细胞的增殖和黑素生成具有潜在负性调控作用，与氧化还原失衡、黑素转运异常、免疫调控异常等机制有关。

关键词

白癜风 / 黑素细胞 / miRNA6089 / MDM2 / SLC17A5 / JAK3