落新妇苷缓解过氧化氢诱导的氧化应激和细胞凋亡减轻内皮细胞损伤

摘要

目的 探讨落新妇苷对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用及机制。方法 采用CCK8法筛选落新妇苷实验浓度。将HUVEC分为对照组、H₂O₂ 组和中/高浓度（50、100μmol/L）落新妇苷组。以H₂O₂（400μmol/L）诱导建立HUVEC氧化损伤模型，检测细胞活力、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、活性细胞内活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）的水平；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测细胞中fas、caspase-8、Bax、Bcl-2、caspase-3的mRNA表达水平；Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Cyto-C、p53、cleaved-caspase-3的蛋白表达水平。结果 CCK8结果显示，落新妇苷在1～100μmol/L浓度范围内，对HUVEC无毒性。与对照组相比，H₂O₂ 组细胞存活率显著降低，细胞皱缩，MDA含量升高，GSH-Px、T-AOC、SOD活性减弱，ROS累积、NO释放增加，Cyto-C、Bax、p53、caspase-3转录和蛋白表达水平升高，而Bcl-2转录和蛋白表达呈下降趋势。与H₂O₂组相比，落新妇苷组HUVEC形态恢复，MDA含量减少，GSH-Px、T-AOC和SOD活性增强，ROS、NO释放减少，Bcl-2蛋白表达呈升高趋势，但Cyto-C、Bax、p53、caspase-3表达水平被抑制。结论 落新妇苷对H₂O₂所致内皮细胞损伤具有明显的保护作用，其机制可能与改善细胞内氧化应激水平和凋亡相关。

关键词

落新妇苷 / 内皮细胞 / 氧化应激 / 细胞凋亡 / 活性氧 / 过氧化氢