Trim31对肝癌细胞索拉非尼耐药的影响及相关机制研究

摘要

目的 探讨三基序蛋白31(Trim31)对肝癌细胞索拉非尼耐药的影响及相关机制。方法 采用GEPIA数据库分析肝癌中Trim31 mRNA表达水平，采用Western blot检测肝癌组织中Trim31蛋白的表达水平。构建过表达Trim31的肝癌细胞系，采用CCK-8实验、集落形成实验和EdU实验评估过表达Trim31对肝癌细胞增殖的影响，采用蛋白富集分析及Western blot筛选验证Trim31下游信号通路。筛选Trim31下调质粒，并构建稳定沉默Trim31的肝癌细胞系，采用Western blot、CCK-8实验、集落形成实验和EdU实验评估沉默Trim31对肝癌细胞增殖的影响。在过表达Trim31的基础上进一步过表达P38,观察其对肝癌细胞增殖的影响，明确Trim31与P38通路之间的调控关系。用索拉非尼处理过表达Trim31的肝癌细胞系，采用CCK-8实验、集落形成实验、EdU实验和Western blot评估过表达Trim31对索拉非尼处理后肝癌细胞增殖的影响及机制。构建索拉非尼耐药肝癌细胞株，并在此基础上构建沉默Trim31的肝癌细胞系，采用CCK-8实验、集落形成实验、EdU实验和Western blot评估沉默Trim31对索拉非尼耐药细胞株增殖的影响及机制。结果 Trim31 mRNA在肝癌组织中呈高表达。过表达Trim31能促进肝癌细胞的增殖，而沉默Trim31可抑制肝癌细胞的增殖；过表达P38可抑制过表达Trim31对肝癌细胞的促增殖作用；Trim31与P38通路之间可能存在负调控作用。过表达Trim31可减弱索拉非尼对肝癌细胞增殖的抑制作用。索拉非尼并不影响肝癌耐药细胞株的增殖，但沉默Trim31后索拉非尼肝癌耐药细胞株的增殖受到显著抑制。结论 Trim31 mRNA在肝癌中呈高表达，沉默Trim31可减弱肝癌细胞对索拉非尼的耐药性，其机制可能与激活P38通路有关。

关键词

肝癌 / 三基序蛋白31 / P38 / 索拉非尼 / 耐药 / 增殖