高含S-腺苷甲硫氨酸饮食通过TET3介导的DNA去甲基抑制小鼠脑卒中后神经元细胞凋亡及活性氧蓄积

摘要

目的 明确高含S-腺苷甲硫氨酸(SAM)饮食是否通过激活10-11易位蛋白3(TET3)促进DNA去甲基化，抑制脑卒中后小鼠神经元细胞的凋亡及活性氧(ROS)产生。方法 将C57BL/6J小鼠分为Sham组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组和SAM组。术后行Morris水迷宫实验评价小鼠神经功能状态，对小鼠脑组织进行取材、切片、苏木精-伊红染色、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色及免疫荧光染色。将PC-12细胞分为Control组、缺氧/复氧(H/R)组和SAM组。流式细胞仪检测细胞ROS水平及凋亡水平；Western blot检测细胞中TET3相对表达量；Dot blot检测细胞内5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)水平。结果 在动物实验中，与Sham组相比，MCAO组小鼠神经功能缺损加重，脑梗死区域明显，脑组织结构排列紊乱且存在大量空洞，神经细胞数量减少，脑切片中TET3蛋白表达减少，5hmC水平降低；而与MCAO组相比，SAM组小鼠神经功能缺损情况减轻，脑梗死区域体积减小，脑组织中的空洞减少，存活神经细胞增多，TET3蛋白表达增多，5hmC水平升高。在细胞实验中，与Control组相比，H/R组缺氧处理可促使细胞内产生大量ROS,诱导细胞发生凋亡，胞内TET3蛋白表达减少和5hmC水平下降；而与H/R组相比，SAM组细胞ROS产生减少，细胞凋亡减少，TET3表达增多和5hmC水平上升。给予TET3抑制剂可消除SAM减少细胞凋亡的作用。结论 高含SAM饮食通过促进TET3介导的DNA去甲基化减轻小鼠脑卒中后神经元损伤，从而发挥保护作用。

关键词

S-腺苷甲硫氨酸 / 去甲基化 / TET3 / 脑卒中 / 细胞凋亡 / 神经保护