LRP1B对Lewis细胞增殖、迁移、侵袭及免疫微环境的影响

摘要

目的 探讨LRP1B基因对Lewis肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及免疫微环境的影响。方法 采用TCGA数据库分析LRP1B基因在肺癌及其他癌种中的表达情况。使用CRISPR/Cas9技术构建LRP1B敲除的Lewis细胞（KO组）,选择野生型Lewis细胞作为对照组（NC组）。免疫印迹法验证上述2组细胞中LRP1B蛋白的表达。采用CCK-8法检测细胞存活率，划痕实验和细胞侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。将制备好的KO组或NC组细胞悬液注射到C57BL/6小鼠右侧腋窝皮下，分别标记为KO组小鼠和NC组小鼠，观察小鼠皮下移植瘤生长情况，流式细胞术检测荷瘤小鼠移植瘤中骨髓源性抑制细胞（MDSC）和CD8⁺ T细胞浸润的变化，免疫组化法检测程序性死亡受体-1 （PD-1）及其配体（PD-L1）的水平。结果 LRP1B基因在肺腺癌和肺鳞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织。与NC组细胞相比，LRP1B基因敲除后KO组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著增加（P<0.05）。与NC组小鼠相比，KO组小鼠形成的移植瘤体积明显增加（P<0.05）;移植瘤中MDSC比例显著增加、CD8⁺T细胞比例减少，PD-L1、PD-1表达水平显著增加（P<0.05）。结论 LRP1B基因敲除可促进Lewis肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，促进PD-L1、PD-1表达。

关键词

肺癌 / 低密度脂蛋白受体相关蛋白1B / 免疫微环境 / 免疫浸润细胞 / 程序性死亡配体1 / 程序性死亡受体-1