细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21在HHV-8病毒裂解复制周期的作用

摘要

目的 研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法 组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)抑制剂SAHA预处理后，倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK.219细胞数，实时定量PCR检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8病毒相关基因的mRNA水平。脂质体转染p21-siRNA后，免疫印迹法检测iSLK.219和TREx-K-Rta BCBL-1细胞中p21蛋白表达，计算RFP阳性iSLK.219细胞百分率，检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中ORF50和PAN的mRNA水平，CCK-8法和台盼蓝染色观察细胞存活情况。结果 SAHA显著增强iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50、PAN及K8.1的mRNA水平和p21蛋白表达，差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA沉默p21后，iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50和PAN mRNA水平显著下降，差异有统计学意义(P<0.05),且保护SAHA介导的TREx-K-Rta BCBL-1细胞死亡。结论 抑制HDAC活性通过调控p21促进HHV-8病毒裂解复制。

关键词

人类疱疹病毒8型 / 病毒裂解复制周期 / 组蛋白去乙酰化酶 / 细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21 / 细胞死亡

基金资助

国家自然科学基金面上项目(81971179); 江苏省教育厅项目(20KJA320004)