达沙替尼体外抑制慢性淋巴细胞白血病增殖及BTKC481S功能

摘要

目的 探讨达沙替尼(BMS-354825)体外对慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia, CLL)细胞系增殖及野生型/耐药突变型布鲁顿激酶(BTK)活化及功能的影响。方法 观察不同浓度的达沙替尼对CLL细胞系的增殖抑制作用。采用不同浓度的达沙替尼及伊布替尼处理外源性表达野生型BTK及常见突变子BTKC481S、BTKT474F及BTKT474I/C481S的细胞系，Western blot检测BTK及其下游靶点PLCγ2的磷酸化水平。结果 达沙替尼能显著抑制CLL细胞系MEC-1及JVM3细胞的增殖，且呈剂量依赖性，IC50分别为3.54μmol/L及0.65μmol/L;0.5μmol/L的伊布替尼及0.2μmol/L的达沙替尼可抑制野生型BTK及PLCγ2的磷酸化活化。当BCR信号激活后，BTKC481S、BTKT474F及BTKT474I/C481S均可功能性激活并磷酸化活化下游PLCγ2,这些突变子均对生理浓度的伊布替尼耐药。0.5μmol/L的达沙替尼体外可抑制BTKC481S活化并进而抑制PLCγ2活化，但不能抑制BTKT474F及BTKT474I/C481S的活化，提示沙替尼体可克服BTKC481S导致的耐药而对“守门员”位点突变无效。结论 达沙替尼可抑制野生型BTK及BTKC481S激酶活化及功能并抑制CLL细胞增殖，有望解决BTKC481S引发的伊布替尼耐药。

关键词

慢性淋巴细胞白血病 / 伊布替尼 / 耐药 / 布鲁顿激酶 / 达沙替尼