miR-381在多囊卵巢综合征颗粒细胞中的表达及其对高迁移率蛋白1的影响

摘要

目的 探讨miR-381在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)颗粒细胞中的表达及其对高迁移率蛋白1 (high-mobility group box 1, HMGB1)的影响。方法 纳入35例健康女性(正常对照组)和64例PCOS患者。按照体重指数(BMI)将PCOS患者分为高BMI-PCOS组(30例)和正常BMI-PCOS组(34例)2种亚型。RT-qPCR验证PCOS亚型组和正常对照组血清中HMGB1 mRNA的表达，取miRNA芯片筛选正常对照组与高BMI-PCOS组患者之间血清中差异表达的miRNA。RT-qPCR验证PCOS亚型组和正常对照组血清中miR-381 mRNA的表达并分析其相关性。人正常卵巢上皮细胞IOSE80和人卵巢颗粒细胞KGN中检测miR-381、HMGB1 mRNA和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-381和HMGB1的靶向关系。人卵巢颗粒细胞KGN中转染miR-381 mimic和inhibitor,检测RIP3的表达以及克隆增殖情况。结果 与对照组相比，正常BMI-PCOS组血清中HMGB1的mRNA表达无差异，高BMI-PCOS组血清中HMGB1 mRNA表达较对照组显著上升(P<0.01)。miRNA结果分析显示高BMI-PCOS组血清中miR-381、miR-141、miR-15b等miRNA表达与对照组相比显著下调，其中miR-381的下调程度最高(P<0.01)。与对照组相比，正常BMI-PCOS组血清中miR-381的mRNA表达无差异，高BMI-PCOS组血清中miR-381的mRNA表达差异较对照组显著降低，并且两者呈负相关(P<0.05)。人卵巢颗粒细胞KGN miR-381 mRNA表达水平低于人正常卵巢上皮细胞IOSE80,HMGB1mRNA和蛋白表达趋势相反(P<0.01)。过表达miR-381增加细胞凋亡水平，抑制细胞克隆和增殖能力(P<0.05),抑制miR-381,结果相反。结论 miR-381在高BMI-PCOS组血清中表达下降，抑制miR-381的表达能够促进HMGB1表达升高，降低卵巢颗粒细胞凋亡，提高克隆和增殖能力。

关键词

多囊卵巢综合征 / miR-381 / 高迁移率蛋白1 / 卵巢颗粒细胞 / 凋亡 / 增殖