负载gp96-Ki67_280-288复合物的树突状细胞疫苗对骨肉瘤的抗肿瘤效应体内实验研究

摘要

目的 研究HSPgp96与Ki67_280-288复合物在体内的特异性抗肿瘤作用机制。方法 设计分组对照实验，分别给予gp96-Ki67_280-288复合物、Ki67_280-288多肽、HSPgp96、PBS免疫HLA-A*0201转基因小鼠。MTT法检测小鼠淋巴细胞增殖情况，ELISA法检测其诱导的细胞毒性T细胞（CTL）分泌干扰素（IFN）-γ水平，乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测所诱导的CTL对U2OS骨肉瘤细胞的杀伤活性，同时在U2OS骨肉瘤动物模型上观察gp96-Ki67_280-288复合物修饰后的树突状细胞（DC）所诱导产生的CTL对肿瘤生长及动物生存期的影响。结果 gp96-Ki67_280-288复合物免疫的小鼠的淋巴细胞表现出最强的增殖能力，淋巴细胞上清液中的IFN-γ水平较其他组升高（P<0.05）;LDH释放实验表明，随着效靶比的提高，各组淋巴细胞对U2OS细胞的杀伤率相应增高（P<0.05）,在效靶比为40∶1的时候最高，gp96-Ki67_280-288组的杀伤率高于HSPgp96组、Ki67组和PBS组（P<0.05）。荷瘤裸鼠实验结果显示，从第12天以后，gp96-Ki67_280-288组小鼠肿瘤体积明显小于其他组（P<0.05）;gp96-Ki67_280-288组的抑瘤率高于HSPgp96组和Ki67组（P<0.05）,较其他3组表现出更长的生存期（P<0.05）。结论 gp96-Ki67_280-288复合物能很好地修饰树突状细胞，使树突状细胞有效地提呈抗原，并诱导抗原特异性抗肿瘤免疫反应，具有很强的体内抗肿瘤作用。

关键词

树突状细胞 / 热休克蛋白 / Ki67 / 骨肉瘤 / 抗肿瘤免疫

基金资助

国家青年科学基金(81202015); 江苏省高校自然科学基金面上项目(12KJB320014); 徐州市科技课题(XM12B025)