Fisetin经c-Fos/NFATc1信号通路抑制小鼠巨噬细胞分化为破骨细胞的研究

摘要

目的 探讨Fisetin阻断c-Fos/NFATc1信号通路对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞向破骨细胞分化的影响。方法 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,根据处理条件不同分为5组：A组(空白对照组)、B组(钛颗粒对照组)、C组(1.25μmol/L Fisetin+钛颗粒)、D组(2.5μmol/L Fisetin+钛颗粒)、E组(5μmol/L Fisetin+钛颗粒)。采用CCK-8法检测各组RAW264.7细胞增殖活性。培养6天后，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测各组细胞破骨细胞(细胞核≥3)数目，免疫印迹法检测各组细胞中c-Fos/NFATcl蛋白表达，RT-PCR法检测c-Fos/NFATc1的基因表达。结果 CCK-8法检测结果显示各组RAW264.7细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。TRAP染色结果显示各组细胞均有TRAP阳性多核细胞生成，B组TRAP阳性多核细胞数目最高，C、D、E组呈现逐渐减少趋势，A组最少。RT-PCR和Western blot检测表明，B组c-Fos/NFATc1表达最高，C、D、E组表达逐渐减少，与B组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Fisetin可通过c-Fos/NFATc1信号通路抑制钛颗粒作用下小鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化，其抑制程度与Fisetin药物浓度有关。

关键词

Fsietin / 小鼠巨噬细胞 / 抗酒石酸酸性磷酸酶 / c-Fos / NFATc1