表达红荧光蛋白的重组痘苗病毒的包装与鉴定

摘要

目的 包装并鉴定表达红荧光蛋白(RFP)基因的重组痘苗病毒(VV-RFP)。方法 以质粒pDsRed-express-C1为模板，PCR扩增出RFP基因，并克隆至痘苗病毒转移载体pCB中，经酶切分析和DNA测序鉴定正确，得到阳性重组质粒pCB-RFP。将该重组质粒用脂质体转染293细胞后再用野生型痘苗病毒感染，通过同源重组获得重组痘苗病毒，利用RFP和gpt抗性标志筛选和噬斑纯化获得重组痘苗病毒VV-RFP。结果 成功包装出表达RFP基因的重组痘苗病毒。结论 包装的VV-RFP为进一步构建携带特定治疗基因的重组痘苗病毒奠定了基础。

关键词

红荧光蛋白 / 痘苗病毒 / 同源重组