Ⅱ型大麻素受体抑制剂对纳米级钛颗粒诱导Ana-1细胞影响的实验研究

摘要

目的 观察Ⅱ型大麻素受体(CB2)选择性抑制剂AM630对纳米级钛(Ti)颗粒诱导下Ana-1细胞的影响。方法 实验分5组，即空白组、颗粒组(Ti 0.5 g/L)、颗粒+AM630 50 nmol/L(AM1)组、颗粒+AM630 100 nmol/L(AM2)组、颗粒+AM630 200 nmol/L(AM3)组。将Ana-1细胞在不同浓度AM630(50、100、200 nmol/L)中培养，采用CCK-8法检测12、24、48 h后细胞增殖活性，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量，采用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测TNF-α、IL-1β、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的表达水平。结果 不同浓度的AM630在各时点对Ana-1细胞增殖均无影响。颗粒组各时点Ana-1细胞上清液中TNF-α、IL-1β的含量与空白组相比明显升高，差异有统计学意义(P<0.01),并且随着时间的延长，炎症因子的含量递增；加入不同浓度AM630后，各时间点细胞上清液中TNF-α、IL-1β的含量较颗粒组呈递减趋势，差异有统计学意义(P<0.05)。颗粒组p-ERK水平较空白组明显增加，而加入不同浓度AM630后，p-ERK水平逐渐降低，差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 CB2选择性抑制剂AM630能通过抑制ERK磷酸化表达水平来降低纳米级钛颗粒诱导的Ana-1细胞炎性因子的表达。

关键词

AM630 / 钛颗粒 / 炎症因子 / 巨噬细胞