人可溶性TRAIL蛋白表达及纯化条件优化

摘要

目的 优化人可溶性TRAIL蛋白生产菌发酵及纯化条件,从而提高TRAIL的产量及活性。方法(1)探索6种不同培养液、培养液pH值、异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度及时间,选择最佳发酵条件;(2)联合镍离子亲和层析及超滤法纯化人可溶性TRAIL蛋白。结果(1)人可溶性TRAIL的最佳发酵条件为pH7.4的YPD培养液,所用IPTG的最佳浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导时间为6 h;(2)经镍离子亲和层析和超滤联合作用可得纯度极高的蛋白。结论 成功完成了人可溶性TRAIL发酵及纯化条件的优化,为今后大量提取TRAIL蛋白奠定了基础。

关键词

TRAIL / 原核表达 / 纯化 / 优化

基金资助

江苏省普通高校研究生科研创新计划(CXZZ12-0986); 徐州市科技计划项目(XZZD1331)