RNA干扰BLIMP1表达对NCI-H929细胞增殖凋亡的影响及可能机制

摘要

目的 探讨RNA干扰B淋巴细胞诱导成熟蛋白(B lymphocyte induced maturationprotein, BLIMP1)表达对多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)细胞株NCI-H929生物学功能的影响及其可能机制。方法 用慢病毒干扰载体及阴性对照载体转染NCI-H929细胞后采用RT-PCR及Western blot方法观察BLIMP1 mRNA及蛋白表达，CCK-8法检测细胞增殖作用，Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡，RT-PCR及Western blot检测未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)信号通路中X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、肌醇必需酶(inositol-requiring enzyme, IRE)1α及凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)的变化。结果 BLIMP1 shRNA转染NCI-H929细胞后，BLIMP1 mRNA、蛋白表达均下调(P<0.05);shRNA/BLIMP1组24、48及72 h细胞增殖率低于转染空载体(shRNA/con)组和对照组(P<0.05),shRNA/BLIMP1组细胞凋亡率[(10.87±1.79)%]高于shRNA/con组[(5.57±0.87)%]和对照组[(4.90±0.57)%](P<0.01);凋亡蛋白CHOP表达上调，XBP1、IRE1α表达下调。结论 沉默BLIMP1可以下调XBP1的表达而抑制UPR反应，发挥其抑制NCI-H929细胞增殖及促进凋亡作用。

关键词

多发性骨髓瘤 / BLIMP1 / XBP1 / UPR反应 / 细胞凋亡