Nod样受体蛋白3(NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达

摘要

目的 探讨Nod样受体蛋白3 (NLRP3)在大鼠原代皮质神经元坏死样凋亡中的表达情况。方法 SD大鼠原代皮质神经元细胞培养12天，Q-VD-Oph预处理30 min后缺糖缺氧刺激诱导坏死样凋亡。(1)将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧2 h,复氧3、6、12、24 h,均用Q-VD-Oph处理),Western blot检测NLRP3蛋白表达，生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)水平；(2)将细胞分为正常对照组、缺糖缺氧组(缺糖缺氧2 h,复氧12 h)、实验组(缺糖缺氧0.5、1、1.5、2、3 h,复氧12 h,均用Q-VD-Oph处理),再次进行NLRP3及LDH测定；(3)细胞缺糖缺氧2 h、复氧12 h(用Q-VD-Oph处理)后免疫荧光观察NLRP3的表达。结果 缺糖缺氧2 h后，随着复氧时间的延长，NLRP3在12 h表达量最高，24 h表达量较12 h下降(P<0.05),LDH在12 h的表达量最高。缺糖缺氧时间不同，各组均复氧12 h时，NLRP3在缺糖缺氧2 h表达量最高，3 h蛋白表达量较2 h下降(P<0.05),LDH在2 h的表达量最高。在缺糖缺氧2 h、复氧12 h,细胞免疫荧光强度最高。结论 NLRP3在原代皮质神经元细胞坏死样凋亡中有表达，且随着NLRP3表达量升高，细胞受损程度相应增高。

关键词

Nod样受体蛋白3 / 坏死样凋亡