Tim3对炎症反应的调控作用及对肝细胞损伤保护机制的研究

摘要

目的 探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白-3(Tim3)在脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞中对炎症反应的调控和肝细胞损伤保护的相关机制。方法 将真核表达质粒沉默Tim3 (shTim3)以及对照组质粒进行慢病毒包装，侵染小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,构建shTim3及对照组慢病毒细胞系，以Western blot检测Tim3在所构建慢病毒细胞系中的表达。通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)和ELISA检测LPS对shTim3以及对照组RAW264.7细胞系产生细胞因子(TNF-α、IL-8和IL-6)的影响，以CCK8实验检测shTim3细胞系所产生细胞因子对肝细胞增殖的影响。结果 Western blot结果显示，shTim3的RAW264.7细胞系较对照组能够显著降低Tim3表达量，shTim3以及对照组慢病毒细胞系构建成功。Q-PCR检测结果显示，LPS活化后的shTim3细胞系中TNF-α、IL-8和IL-6的mRNA表达量较对照组显著升高(P<0.05)。ELISA结果显示，shTim3组与对照组相比，TNF-α与IL-8的分泌增加(P<0.05)。CCK8检测显示，与对照组相比，经LPS活化后的shTim3组对于肝细胞的增殖抑制作用更大(P<0.05)。结论 Tim3通过抑制巨噬细胞活化减少细胞因子产生及分泌，进而降低炎症反应，促进肝细胞增殖。

关键词

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白-3 / 巨噬细胞活化 / 细胞因子 / 炎症 / 免疫