西格列汀对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化的影响

摘要

目的 探讨西格列汀（SIT）对高糖培养的肾小管上皮细胞转分化的影响。方法 将体外培养的人近端肾小管上皮细胞HK-2分为正常组（NG组，5.56 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG组，60 mmol/L葡萄糖）、西格列汀组（SIT组，60 mmol/L葡萄糖+5μmol/L西格列汀）等，在用CCK-8证实西格列汀对正常培养的HK-2细胞无毒性的基础上，选择一个有效的药物浓度，以转化生长因子-β₁（TGF-β₁）抑制剂SB-431542（5μmol/L）作为对照。各组细胞培养72 h时后，倒置显微镜观察HK-2细胞形态。采用Western blot法检测细胞中TGF-β₁、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及E-cadherin蛋白表达。结果 高糖可以诱导HK-2细胞形态由多边鹅卵石样发生纤维化样改变，上调细胞中促纤维化因子TGF-β₁蛋白表达，降低细胞中上皮表型蛋白E-cadherin的表达，并增加间质表型蛋白α-SMA的表达。CCK-8结果显示，西格列汀浓度超过5μmol/L对正常培养的HK-2细胞具有毒性。西格列汀可以改善高糖导致的HK-2细胞形态的变化，并逆转高糖诱导的HK-2细胞中TGF-β₁表达的增加、E-cadherin表达的减少及α-SMA表达的增加；TGF-β₁的抑制剂SB-431542也能达到与西格列汀相同的效果。结论 西格列汀可以改善高糖诱导的HK-2细胞上皮-间质转分化，此效应可能与抑制TGF-β₁信号通路有关。

关键词

高糖培养 / 肾小管上皮细胞 / 西格列汀 / 转化生长因子-β₁