一种改进的非酶处理分离新鲜肾癌组织中浸润淋巴细胞的方法

摘要

目的 建立一种快速简便的不经过消化酶处理而直接分离、纯化新鲜肾癌组织浸润淋巴细胞的新方法。方法 手术切除的新鲜肾癌组织经过机械剪碎、温和匀浆处理制备成单细胞悬液，再通过Ficoll密度梯度离心分离肿瘤浸润淋巴细胞，密度梯度分离后经CD3磁珠分选纯化。结果 成功建立了快速从新鲜肾癌组织分离肿瘤浸润淋巴细胞的新方法，成功完成7例组织分离。分析结果显示CD3⁺ T细胞占（24.10±17.60）%,CD4⁺和CD8⁺细胞分别占（37.69±9.83）%、（37.86±10.47）%;进一步经磁珠纯化后CD3⁺T细胞纯度达91.6%,适用于后续分析。结论 本法优势在于：（1）与酶消化法相比，有利于保护细胞膜表面受体，最大程度全面反映肿瘤组织中淋巴细胞亚群的浸润情况；（2）短暂、快速、温和匀浆处理，操作时间短，有利于维持细胞的高活力。

关键词

肿瘤浸润淋巴细胞 / 非酶处理 / 新鲜组织 / 肾癌