Mx1基因表达对VSV溶瘤敏感性的影响

摘要

目的 研究3种小鼠肿瘤细胞系鼠黏病毒蛋白1（Mx1）基因表达对水泡性口膜炎病毒（vesicular stomatitis virus, VSV）溶瘤效应的敏感性。方法 将本实验室定量后的VSV保种并用来攻击3种不同种类的肿瘤细胞系：RAW264.7（小鼠巨噬细胞白血病）、B16（黑色素瘤）、HEPA1-6（小鼠肝癌）细胞系，48 h后通过TCID₅₀法和MTT法检测3种肿瘤细胞系对VSV的敏感性。RT-PCR检测VSV感染3种肿瘤细胞系24 h后Mx1基因的诱导表达水平，证实肿瘤细胞系的溶瘤敏感性与Mx1基因表达的关系；应用RNAi技术抑制Mx1基因的表达水平，MTT法检测RAW264.7细胞系（最不敏感细胞系）与B16细胞系（最敏感细胞系）溶瘤效果的改变。结果 用VSV攻击3种肿瘤细胞系呈现出的敏感性依次为B16>HEPA1-6>RAW264.7。通过RT-PCR检测VSV感染3种鼠源肿瘤细胞系Mx1基因的表达水平表明：Mx1基因的表达水平越高，VSV对肿瘤细胞的溶瘤敏感性越低。应用RNAi技术抑制RAW264.7细胞系（最不敏感细胞系）Mx1基因的表达，VSV对该细胞系溶瘤敏感性提高了35%,抑制B16细胞系（最敏感细胞系） Mx1基因的表达，VSV对该细胞系溶瘤的敏感性提高了30%。结论 通过RNAi抑制鼠源肿瘤细胞系抗病毒蛋白Mx1基因的表达水平，可促进VSV溶瘤的敏感性。

关键词

鼠黏病毒蛋白1 / 水泡性口膜炎病毒 / 溶瘤 / RNA干扰