流式细胞术检测小鼠肝脏中嗜酸性粒细胞方法的建立

摘要

目的 建立稳定的流式细胞术检测小鼠肝脏组织浸润嗜酸性粒细胞的方法。方法 华支睾吸虫感染4周小鼠及正常小鼠肝脏原位灌注后，制备肝组织单细胞悬液，Procell密度梯度离心获得肝脏白细胞；采用多色流式细胞术，前向角散射（FSC）、侧向角散射（SSC）及CD45等参数圈门，利用抗Gr-1、Siglec-F等分子的流式抗体对其中的嗜酸性粒细胞进行标记、检测分析。结果 正常肝脏白细胞流式检测显示在前散射中等位置(FSC^mid)、侧散较高处(SSC^hig)有一群细胞，表型多为CD45⁺CD3^-CD19^-;华支睾吸虫感染后该群细胞比例明显增高，该群细胞不表达MHCⅡ类分子（MHCⅡ^-）,低表达Gr1(Gr1^low),表达Siglec F（Siglec F⁺）。结论 流式细胞术检测CD45⁺FSC^midSSC^higGr1^lowSiglec F⁺细胞是一种稳定的检测及分析肝脏嗜酸性粒细胞数量及功能的方法。

关键词

嗜酸性粒细胞 / 流式细胞术 / 华支睾吸虫

基金资助

国家自然科学基金面上项目(81572019); 2015年度江苏省脑病生物信息重点实验室开放研究课题(1506); 2016年度江苏省高校自然科学面上项目(16KJB310016)