全身microRNA-21基因敲除小鼠的繁育和鉴定

摘要

目的 利用Cre/loxp基因敲除技术制备全身microRNA-21（miR-21）基因敲除小鼠，并进行鉴定，为进一步在整体动物水平研究宿主miR-21在血吸虫感染后发挥的调控作用提供研究平台。方法 将引进的miR-21^flox/flox小鼠和全身表达Cre重组酶的小鼠分别进行繁殖和鉴定，两种小鼠进行杂交，对其子代小鼠（F1）的基因型进行鉴定；将基因型为miR-21^flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21^flox/flox小鼠进行杂交，对其子代小鼠（F2）的基因型进行鉴定。结果 共繁殖亲代miR-21^flox/flox小鼠20只，经鉴定均为miR-21 flox纯合子小鼠，繁殖表达Cre重组酶的亲代小鼠17只。亲代小鼠杂交并繁殖，得到基因型为miR-21^flox/-Cre的F1小鼠10只。将miR-21^flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21^flox/flox小鼠杂交并繁殖，得基因型为miR-21^flox/floxCre或miR-21^flox/-Cre的F2小鼠，miR-21^flox/floxCre小鼠即为本实验所需要构建的全身miR-21基因敲除小鼠。这种基因敲除小鼠与正常小鼠身长、体重无明显差异。结论 本研究利用Cre/loxp技术成功繁育出全身miR-21基因敲除小鼠。

关键词

基因敲除小鼠 / Cre/loxp技术 / miR-21