CD5分子调控套细胞淋巴瘤细胞株对柔红霉素化疗敏感性的机制研究

张哲; 桑威; 王莹; 魏翔宇; 闫冬梅; 朱峰; 徐林艳; 徐开林

徐州医科大学学报 ›› 2016, Vol. 36 ›› Issue (05) : 281 -286.

张哲, 桑威, 王莹, 魏翔宇, 闫冬梅, 朱峰, 徐林艳, 徐开林

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摘要

目的探索CD5分子对套细胞淋巴瘤化疗药物敏感性的影响及其分子机制。方法 Crispr/cas9法敲除人源套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1（P）的CD5基因，构建Jeko-1（N）(CD5 negative)细胞；RT-PCR检测Jeko-1（P）与Jeko-1（N）细胞CD5-E1A和CD5-E1B表达；以不同浓度柔红霉素处理2种细胞，MTS法检测细胞增殖抑制效应；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡；Western blot检测细胞凋亡抑制蛋白B淋巴细胞瘤2蛋白（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、人粒细胞白血病1蛋白（myeloid cell leukemia-1,Mcl-1）、B淋巴细胞瘤XL蛋白（B-cell lymphoma-xl, Bcl-XL）的表达。结果 Jeko-1（N）细胞不表达CD5-E1A、CD5-E1B;柔红霉素处理后，Jeko-1（N）细胞抑制率高于Jeko-1（P）细胞，IC₅₀低于Jeko-1（P）细胞（P<0.05）,G₀/G₁期细胞比例增加，S期细胞比例减少（P<0.05）,24 h、48 h细胞凋亡率较Jeko-1（P）增加，Bcl-2、Mcl蛋白表达量较Jeko-1（P）细胞无明显变化，凋亡抑制蛋白Bcl-XL表达量上调。结论 CD5基因敲除的Jeko-1细胞株通过调控淋巴瘤细胞阻滞于G₀/G₁期，以及上调Bcl-XL蛋白的表达增强对柔红霉素的化疗敏感性。