敲低PTEN表达对纺锤体正常结构的破坏作用及其相关机制研究

摘要

目的 探讨PTEN干扰对有丝分裂纺锤体形成的影响及其可能机制。方法 用慢病毒干扰载体及阴性对照载体转染HeLa细胞后采用qPCR及Western blot技术检测PTEN mRNA及蛋白表达水平,有丝分裂测定实验镜下观察细胞有丝分裂指数,免疫荧光染色技术观察纺锤体的形态、结构,Western blot实验检测Eg5蛋白表达变化。结果 PTEN shRNA转染HeLa细胞后,PTEN的mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P<0.05);与对照组相比,shPTEN组细胞的有丝分裂指数明显上调(P<0.01);免疫荧光结果显示shControl组中可见正常的纺锤体形成,而shPTEN组中可见形态及结构异常的纺锤体,且纺锤体的长度显著小于对照组(P <0.01);驱动蛋白Eg5在shPTEN组中表达明显低于对照组(P<0.05)。结论 PTEN干扰可能通过下调Eg5蛋白的表达水平导致有丝分裂及纺锤体形成异常。

关键词

PTEN / 有丝分裂 / 纺锤体 / Eg5