FOXA1对17β-雌二醇诱导的子宫内膜癌细胞上皮间质转化的影响及机制探讨

摘要

目的 探讨FOXA1对雌激素诱导的Ishikawa细胞上皮间质转化的影响及其机制。方法 应用子宫内膜癌lshikawa及HEC-1A细胞系。不同浓度(0、10^-10、10^-8、10^-6 mol/L) 17β-雌二醇（17β-E₂）分别作用Ishikawa及HEC-1A细胞48 h后,Western blot法检测上皮标志物E-cadherin及间质标志物Vimentin蛋白表达水平,建立雌激素诱导的上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）模型。siRNA沉默叉头盒A1（FOXA1）基因或质粒转染过表达FOXA1后,RT-PCR及Western blot法检测正常对照组、EMT模型组、E₂+质粒空载组、E₂+FOXA1沉默组或E₂+FOXA1过表达组上皮标志物E-cadherin、间质标志物Vimentin、雌激素受体α（ERα）蛋白表达水平;Transwell侵袭试验检测各组细胞侵袭能力。结果 与对照组相比,不同浓度E₂作用Ishikawa细胞48 h后,10^-8及10^-6 mol/L组Ishikawa细胞中上皮标志物E-cadherin蛋白的表达水平明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）;Vimentin蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义（P <0.01）,其中,10^-8 mol/L为诱导EMT发生的最佳浓度。经不同浓度E₂作用后,HEC-1A细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白表达均无明显变化,差异无统计学意义。在Ishikawa细胞中,siRNA沉默FOXA1后,促进了10^-8 mol/L的E₂诱导的Ishikawa细胞EMT的发生,且增强了细胞侵袭力,差异有统计学意义（P<0.01）;而FOXA1过表达后,10^-8 mol/L的E₂的处理则无法诱导Ishikawa细胞EMT的发生,FOXA1的过表达抑制了细胞的侵袭力。结论 FOXA1可以抑制17β-E₂诱导的子宫内膜癌EMT的发生,其作用机制可能与FOXA1介导的ERα蛋白表达增加有关。

关键词

子宫内膜癌 / 17β-E₂ / 上皮间质转化 / FOXA1 / 雌激素受体