柱前衍生化结合气质联用同时测定糖尿病肾病大鼠血浆中18种氨基酸含量

摘要

目的 建立同时测定大鼠血浆中18种氨基酸的柱前衍生化结合气质联用（GC-MS）分析方法。方法大鼠血浆用氯甲酸乙酯衍生化后进行GC-MS分析,条件如下:Agilent HP-5MS UI（60 m×0.25 mm×0.25μm）柱为固定相;程序升温;进样口温度240℃;不分流模式进样;载气为高纯氦气,流速设为1.0 ml·min^-1、采用电子轰击离子源;选择离子监测模式;离子源温度230℃;电子能量70 eV;溶剂延迟时间5.45 min。结果 18种氨基酸得到较好分离,且在1.6～2 400μmol·L^-1范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系（r²>0.9985）;批内及批间精密度（RSD）均小于10%;样品平均加样回收率及基质效应分别为72.17%～111.4%和90.42%～114.6%;血浆室温放置8 h、-80℃放置28天,血浆衍生化后4℃放置12 h、-20℃放置24 h均稳定;和正常大鼠相比,除组氨酸和脯氨酸外,糖尿病大鼠血浆中其他16种氨基酸含量均发生了显著变化。结论 该方法简便易操作、准确度高、特异性好,而且该衍生化产物稳定、线性范围宽、基质效应小,可用于正常及糖尿病大鼠血浆中氨基酸的测定。

关键词

氨基酸 / 柱前衍生化 / 气质联用法 / 糖尿病肾病 / 大鼠血浆