不同转染试剂对制备CAR-T细胞的病毒包装效果比较

摘要

目的 为提高制备嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T cell,CAR-T）的病毒包装滴度,比较并确定有效的病毒包装转染试剂。方法 应用氯化钙（CaCl₂）、Transintro^TM EL、脂质体Lip2000三种质粒转染试剂对逆转录病毒载体质粒MSCV-IRES-GFP（MIG1）、含嵌合抗原受体（CAR）及HA标签的逆转录病毒载体质粒MSCV-IRES（MIG2）、真核表达质粒pIRES2EGFP-DDR1 （PDDR1）进行转染,荧光显微镜观察、流式细胞检测上述试剂的转染效率。结果 Transintro^TM EL均获得相对较高的转染效率,对MIG1为（43.90±0.57）%,对MIG2为（42.80±0.57）%,对PDDR1为（58.90±0.71）%。而脂质体Lip2000的转染效率均相对较低,对MIG1为（5.20±0.42）%,对MIG2为（9.75±0.07）%,对PDDR1为（22.4±0.28）%。CaCl₂在同一转染体系下对不同质粒转染效果不同。结论 对于制备CAR-T细胞的病毒包装,Transintro^TM EL试剂能够稳定获得较高的转染效率。

关键词

病毒包装 / 转染试剂 / 293T细胞