炎症因子诱导HT22细胞凋亡模型的建立

摘要

目的 构建相关炎症因子诱导HT22细胞的凋亡模型,为进一步探索神经炎症致神经元凋亡的发病机制和抗细胞凋亡提供理论基础。方法 采用BV2小鼠小胶质细胞及HT22小鼠海马神经元细胞系。0.5、1.0μg/ml的脂多糖(LPS)处理BV2细胞0、6、12、24 h,检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)等炎症因子的水平。将上述BV2细胞的上清液孵育HT22细胞不同时间。然后,CCK-8法检测HT22细胞的存活率,AnnexinV检测HT22细胞的凋亡情况。结果 与0.5、1.0μg/ml LPS处理0h后相比,处理6、12、24h后BV2细胞可分泌IL-6、TNF、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、IL-10。1.0μg/ml LPS刺激BV2细胞24 h后产生的上清液对HT22细胞的存活率与处理0 h相比有显著影响,差异有统计学意义(P<0.05);与处理0 h相比,处理12、24、48 h后的HT22细胞存活率均数分别下降16.9%、40.12%、77.22%。HT22细胞经BV2细胞上清液处理12、24、48 h后的细胞凋亡率高于未经处理的细胞,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。结论1.0μg/ml LPS刺激BV2细胞24 h后所得培养基上清液处理HT22细胞24 h可作为模拟神经炎症促神经元细胞凋亡的理想模型。

关键词

脂多糖 / 小胶质细胞 / 炎症 / 小鼠海马神经元细胞 / 凋亡