外源性H₂S增加Keap1硫巯基化水平延缓大鼠主动脉内皮细胞衰老的机制

摘要

目的 研究硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）延缓大鼠主动脉内皮细胞（RAECs）衰老的机制。方法 细胞按不同处理方法分为6组:年轻组、老年组、DMSO组、NaHS组、ATRA组、NaHS+ATRA组。用β-半乳糖苷酶（β-gal）染色法检测内皮细胞的老化程度,用改良生物素法测定内皮细胞Keap1巯基蛋白,用免疫印迹法测定内皮细胞核转录因子（Nrf2）和超氧化物歧化酶2（SOD2）。结果 与年轻组相比,老年组细胞β-gal染色阳性数升高（P<0.01）。给予外源性H₂S（NaHS）处理后,老年组细胞染色阳性数降低（P<0.01）。预先给予Nrf2阻断剂全反式维甲酸（ATRA）后,老年组细胞染色阳性数升高（P<0.01）。与老年组相比,NaHS处理组内皮细胞Keap1硫巯基化水平、Nrf2和SOD2蛋白表达均升高（P <0.01）;预先给予ATRA阻断Nrf2蛋白表达后,内皮细胞Nrf2及SOD2蛋白表达均明显降低（P<0.01）。结论 外源性H2S能通过提高内皮细胞Keapl的硫巯基化水平,减弱Keap1对Nrf2的抑制作用,促进Nrf2进入细胞核,从而增加其下游SOD2蛋白的表达,提高内皮细胞的抗氧化应激作用,延缓内皮细胞的衰老进程。

关键词

硫化氢 / 衰老 / 巯基化 / 大鼠主动脉内皮细胞