小鼠IL-33基因cDNA克隆与真核质粒的构建与表达

张林, 程晓刚, 练栩辉, 李鑫, 刘林娜, 赵柏程, 任飞, 李晗郡, 刘平

徐州医科大学学报 ›› 2010, Vol. 30 ›› Issue (07) : 429 -431.

张林, 程晓刚, 练栩辉, 李鑫, 刘林娜, 赵柏程, 任飞, 李晗郡, 刘平

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摘要

目的克隆小鼠IL-33基因(mIL-33)cDNA构建其真核表达质粒,并转染EL-4细胞检测其表达。方法提取小鼠脑与肺组织总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增小鼠IL-33基因cDNA,酶切后插入pcDNA-3.1构建其真核表达载体pcDNA-mIL-33,重组质粒转染EL-4细胞,RT-PCR与ELISA法检测目的基因表达。结果 pcDNA-mIL-33中插入的DNA序列测定结果与mIL-33 cDNA序列一致,重组质粒转染EL-4细胞后检测到相应基因表达。结论成功克隆小鼠IL-33基因cDNA,并构建其真核表达质粒。