靶向骨桥蛋白shRNA表达载体的构建与鉴定

徐伟; 魏苏; 陆晓媛

徐州医科大学学报 ›› 2010, Vol. 30 ›› Issue (03) : 192 -195.

徐伟, 魏苏, 陆晓媛

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

PDF

摘要

目的通过构建骨桥蛋白(osteopontin,OPN)shRNA表达载体,探索卵巢癌基因治疗新途径。方法根据基因库上的OPN-mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSilence质粒中,并对重组质粒进行酶切及序列鉴定。结果OPNsiRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论靶向OPN shRNA表达载体的构建成功为研究降低卵巢癌OPN表达的抗肿瘤效应,及与放化疗的协同效应打下了基础。