表达翻转重组酶的真核载体的构建

摘要

目的 构建表达翻转重组酶(FLP)重组表达的真核载体。方法 以质粒pFRT为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增出两端包含了XbaⅠ和BamHⅠ内切酶识别位点的全长FLP基因片段,将该片段插入用NheⅠ和BamHⅠ双酶切后的载体质粒pBK-CMV上,构建出重组质粒pBK-CMV-FLP。经过转化、挑选菌落,PCR鉴定且测序均正确。结果 成功构建重组质粒pBK-CMV-FLP。结论 构建好的pBK-CMV-FLP质粒为生物工程上删除筛选标记物提供了良好的条件。

关键词

翻转重组酶 / 重组 / 真核载体