小鼠胰岛素样生长因子-1基因体外克隆及表达的研究

摘要

目的 探讨小鼠胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达。方法 通过RT-PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的cDNA,将该基因亚克隆入重组质粒p1 (pcDNA3.1-NestinEGFP)中,构建重组质粒p2 (pcDNA3.1-Nestin-EGFP-IGF-1),脂质体转染COS-7细胞,ELISA检测细胞培养基中IGF-1蛋白量。结果 克隆IGF-1基因cDNA与GenBank中该基因序列一致,重组质粒转染COS-7细胞培养基中均含有IGF-1蛋白。结论 IGF-1基因成功构建到重组质粒P2中,且能在COS-7细胞中过表达。

关键词

胰岛素样生长因子-1 / 小鼠 / 克隆 / 转染 / 表达

基金资助

江苏省自然科学基金(BK2010180); 徐州市社会发展科学基金(XM09B116); 徐州医学院院长基金(2010KJZ10)