硫化氢对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其机制研究

摘要

目的 观察硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）对内皮细胞凋亡的影响,并从抗氧化的角度初步探讨其作用机制。方法 以硫氢化钠（sodium hydrosulfide,NaHS）作H₂S的供体,人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）经10μmol/L NaHS预孵育24 h后加入33 mmol/L葡萄糖（高糖）作用48 h,以正常对照组、高糖损伤组和10μmol/L NaHS预处理组作为对照,DAPI荧光染色观察细胞核形态的变化并检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞黄嘌呤氧化酶（XOD）和超氧化物歧化酶（SOD）蛋白质的表达。结果 DAPI染色荧光显微镜观察发现,与正常对照组相比,高糖损伤组HUVECs中出现大量的核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞,NaHS预处理的HUVECs中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀的低强度荧光。Western Blot结果显示,33 mmol/L葡萄糖孵育HUVECs 48 h后,与正常对照组相比,SOD蛋白表达降低37.17%,XOD蛋白的表达增加47.06%;10μmol/L NaHS预处理组与高糖损伤组相比,HUVECs SOD蛋白的表达增加27.52%,XOD蛋白表达降低31.20%。结论 H₂S对高糖诱导的HUVECs凋亡具有拮抗作用,并与其抑制高糖引起的细胞内SOD水平的降低、XOD升高有关。

关键词

硫化氢 / 内皮细胞 / 细胞凋亡 / 高糖 / 氧化应激