HIF-1α在缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis中的表达

摘要

目的 探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是否参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis。方法 原代皮质神经元培养14天,予caspase抑制剂Z-VAD-FMK(20μmol/L)预保护30 min,缺糖缺氧2 h,再灌注0、2、6、12、24、48 h,进行LDH测定;RT-PCR测HIF-1α RNA表达;Western blot检测总HIF-1α蛋白表达情况;分别提取细胞质和细胞核蛋白,Western blot分别检测胞质、胞核内HIF-1α蛋白表达情况。结果 caspase抑制剂Z-VAD-FMK预作用30 min、缺糖缺氧2 h、再灌注2 h后培养基中LDH增加(P<0.05),再灌注12 h达高峰;缺糖缺氧后HIF-1α RNA表达无变化(P>0.05);HIF-1α总蛋白表达增加(P<0.05),再灌注12 h达高峰;再灌注6 h时细胞质HIF-1α蛋白表达达高峰(P<0.05),随后降低;再灌注12 h时,细胞核HIF-1α蛋白表达达高峰(P<0.05),随后降低。结论 HIF-1α参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis。

关键词

低氧诱导因子-1α / necroptosis / 缺糖缺氧 / 原代皮质神经元