低氧激活ERK/JNK通路促进Smad2/3蛋白磷酸化诱导小鼠心脏成纤维细胞表型转换的实验研究

摘要

目的 研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts,CMFs）表型转换过程中,促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPK）信号通路与Smad2/3蛋白磷酸化的关系。方法 新生小鼠第1代CFs低氧（37℃、3%O₂）无血清培养48 h,免疫荧光检测α-SMA蛋白;新生小鼠CFs给予3种MAPK（ERK、JNK和p38）特异性抑制剂常氧培养1 h,进行低氧培养30 min,免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2/3蛋白磷酸化水平。结果（1）低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达;（2）低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化,PD98059（ERK特异性抑制剂）、SP600125（JNK特异性抑制剂）和SB203580（P38特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化;（3）PD98059（ERK特异性抑制剂）和SP600125（JNK特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的Smad2/3蛋白的磷酸化,SB203580（P38特异性抑制剂）无此作用。结论（1）低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs;（2）ERK和JNK信号通路能调控Smad2/3蛋白的磷酸化表达;（3）MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化。

关键词

低氧 / 心脏成纤维细胞 / 心脏肌成纤维细胞 / 促分裂素原活化蛋白激酶 / Smad / 小鼠