鞘内注射miRNA-28模拟物减轻CFA慢性炎性疼痛模型大鼠热激疼痛行为

摘要

目的 对完全弗氏佐剂(CFA)慢性炎性疼痛模型不同时间段的脊髓以及背根神经节miRNA-28表达进行荧光定量PCR分析,鞘内注射miRNA-28模拟物并观察大鼠热激疼痛行为学变化,预测miRNA-28下游作用靶标基因。方法 采用CFA制备慢性炎性疼痛SD大鼠模型;从大鼠脊髓和背根神经节组织中提取miRNA,运用RT-qPCR方法对miRNA-28进行定量分析;鞘内微注射miRNA-28模拟物,热激法检测大鼠疼痛行为;使用3种不同的生物信息学预测软件对miRNA-28靶标进行分析;Western-blot方法检测CFA模型大鼠第3天时背根神经节中Nnat蛋白表达。结果 miRNA-28在CFA疼痛模型脊髓和背根神经节中均有表达,但表达情况并不一致:miRNA-28在背根神经节表达差异明显,其中以第3天最为显著,下调至对照水平的1.28%;在脊髓组织,2 h时miRNA-28已经下调至对照水平的55.56%,第3天时又上调至对照水平的190%,第7天又下调至对照水平的83%。鞘内微注射miRNA-28模拟物后明显减轻CFA大鼠疼痛反应。生物信息学分析表明Nnat可能是miRNA-28作用的靶标基因。CFA模型大鼠第3天时背根神经节中Nnat蛋白明显升高。结论 miRNA-28可能在背根神经节水平通过调控Nnat参与慢性炎性疼痛的发生、维持和调控。

关键词

炎性疼痛,慢性 / miRNA-28 / 靶标基因 / 脊髓 / 背根神经节