NF-κB在模拟缺血/再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中的作用

摘要

目的 观察核因子κB（NF-κB）在模拟缺血/再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中活性的变化,并进一步阐明其作用。方法 采用人胃黏膜上皮细胞株进行体外培养并传代,细胞以缺氧（5%CO₂、1%O₂、94%N₂）+无糖KR液模拟缺血、缺氧,复氧、复糖模拟再灌注诱导胃黏膜上皮细胞凋亡,用流式细胞术、免疫组化法、免疫印迹法观察正常对照组、模拟缺血/再灌注损伤组（I-R组）、NF-κB的抑制剂PDTC预处理组(使用10μmol·L^-1PDTC预处理胃黏膜上皮细胞24 h)于模拟缺血1 h、再灌注6 h后细胞凋亡及NF-κB的表达情况。结果 （1）I-R组细胞凋亡率较正常对照组明显增高（P<0.01）,PDTC预处理组细胞凋亡率较I-R组明显下降（P<0.01）。（2）正常对照组胃黏膜上皮细胞核内极少有NF-KB表达,I-R组细胞核内NF-κB表达明显增加,PDTC预处理组NF-κB核转位现象减轻,胞核染色明显减少。（3）I-R组与正常对照组比较,胃黏膜上皮细胞核NF-κB蛋白表达水平显著增高（P<0.01）;PDTC预处理组与I-R组比较,NF-κB蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。结论 模拟缺血/再灌注能增加人胃黏膜上皮细胞核内NF-KB的表达,NF-κB的激活具有促进细胞凋亡的作用;PDTC可以抑制细胞凋亡,对人胃黏膜上皮细胞模拟缺血/再灌注损伤有保护作用。

关键词

胃缺血/再灌注 / 胃黏膜上皮细胞 / 细胞凋亡 / 核因子κB / 硫代氨基甲酸吡咯烷