泛素特异性蛋白酶25对上皮来源胸腺基质淋巴细胞生成素促过敏性鼻炎发生效应的作用研究

摘要

目的 探讨泛素特异性蛋白酶25(USP25)对上皮来源胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)促过敏性鼻炎(AR)发生效应的作用及可能机制。方法 收集40例接受鼻中隔或鼻甲手术患者的鼻黏膜组织，分为对照组和AR组，各20例。实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测患者鼻黏膜USP25的表达，免疫组化检测AR患者鼻黏膜组织USP25定位。将60只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、AR组、AR+过表达阴性对照(oe-NC)组和AR+USP25过表达(oe-USP25)组，除对照组外的其余小鼠均使用卵清蛋白制备AR模型，AR+oe-NC组和AR+oe-USP25再分别给予质粒载体(pcDNA)或USP25过表达质粒(pcDNA-USP25)脂质体混合物，结束后评估各组小鼠AR症状；苏木精-伊红染色法观察小鼠鼻黏膜病理学和炎症变化；酶联免疫吸附试验检测小鼠鼻灌洗液1/2型辅助性T细胞(Th1/Th2)相关细胞因子水平。将人鼻上皮细胞RPMI2650分为对照(Control)组、屋尘螨(HDM)组、HDM+pcDNA组、HDM+pcDNA-USP25组、HDM+pcDNA-USP25+小干扰(si)RNA-NC组和HDM+pcDNA-USP25+si-转化生长因子β活化激酶1(TAK1)组并进行相应siRNA和pcDNA质粒转染。蛋白免疫印迹检测各组小鼠鼻黏膜和细胞中USP25、TSLP和TAK1蛋白表达。结果 USP25在AR患者鼻黏膜组织中表达升高，且主要定位于上皮层。过表达USP25可逆转AR小鼠症状、鼻黏膜损伤、Th1/Th2失衡，降低TAK1表达并上调TSLP表达。体外实验显示，过表达USP25后敲除TAK1可逆转单纯HDM后过表达USP25诱导的TSLP表达降低。结论 USP25可能通过诱导TRAF3表达抑制鼻黏膜上皮中TSLP信号转导，从而改善AR的Th2型炎症反应。

关键词

过敏性鼻炎 / 泛素特异性蛋白酶25 / 上皮来源胸腺基质淋巴细胞生成素 / 转化生长因子β活化激酶1