TIGAR在葡聚糖硫酸钠诱导结肠炎中的保护作用

摘要

目的 探讨TP53诱导的糖酵解和凋亡调控因子(TIGAR)基因缺失对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的影响及潜在机制。方法 选用C57BL/6背景的TIGAR基因敲除(TIGAR-KO)小鼠及野生型(WT)小鼠，给予3%DSS自由饮用8 d,建立小鼠急性结肠炎模型。每日监测小鼠体重变化，评估结肠缩短程度；结肠组织通过苏木精-伊红(H-E)染色、过碘酸-希夫(PAS)染色进行病理分析；通过转录测序技术(RNAseq)分析差异表达基因的基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析，并通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)验证RNAseq结果。结果 与TIGAR-KO组小鼠相比，TIGAR-KO+DSS组小鼠体重下降更显著，疾病活动指数(DAI)评分更高，结肠缩短更严重，且死亡率升高；H-E染色显示TIGAR-KO+DSS组小鼠结肠黏膜隐窝结构广泛破坏、深部溃疡形成及密集中性粒细胞浸润，PAS染色显示其杯状细胞数量锐减，黏液分泌功能显著受损；KEGG分析表明，TIGAR-KO组中Ras信号通路、MAPK信号通路及炎症性肠炎通路显著富集，提示TIGAR缺失通过激活Ras-MAPK信号级联反应，加剧肠道炎症反应和黏膜免疫失衡；GO富集分析显示，TIGAR缺失影响生物过程中的刺激应答、细胞组分中的蛋白复合物组成及分子功能中的催化活性与结合能力，进一步支持其对氧化应激和代谢调控的干预作用；与TIGAR-KO组相比，TIGAR-KO+DSS组小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞外调节蛋白激酶1(ERK1)的mRNA水平显著升高，紧密连接蛋白1(Claudin-1)的mRNA表达水平显著降低。结论 TIGAR基因缺失加重DSS诱导的小鼠结肠炎，其保护作用可能与抑制过度炎症反应和维持肠黏膜屏障功能有关。本研究为炎症性肠病的治疗提供了新的靶点。

关键词

TIGAR / 炎症性肠病 / 葡聚糖硫酸钠 / 结肠炎 / Ras-MAPK信号通路

基金资助

国家自然科学基金(82271405); 江苏省卫生健康委医学科研项目(M2024040)